離心機在PCR實驗中起著重要的作用，PCR是一種體外DNA 擴增技術(shù)，是在模板DNA、引物和4種脫氧核苷酸存在的條件下，依賴于DNA聚合酶的酶促合反應(yīng)，將待擴增的DNA片段與其兩側(cè)互補的寡核苷酸鏈引物經(jīng)“高溫變性——低溫退火——引物延伸”三步反應(yīng)的多次循環(huán)，使DNA片段在數(shù)量上呈指數(shù)增加，從而在短時間內(nèi)獲得我們所需的大量的特定基因片段。

下面簡單介紹下PCR的實驗步驟：

(1)在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。      

10×PCR buffer                    

5 μl     dNTP mix （2mM）              

4 μl     引物1（10pM）                  

2 μl     引物2（10pM）                  

2 μl     Taq酶 （2U/μl）                

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

(2)調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，最后在72℃ 保溫7min。

(3)結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

從以上反應(yīng)步驟可以清楚看到，離心機在PCR實驗中是必不可少的實驗工具。